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首頁-產(chǎn)品系統(tǒng)-細(xì)胞-原代細(xì)胞-人腎臟上皮細(xì)胞 4120

人腎臟上皮細(xì)胞 4120
產(chǎn)品型號:
簡要描述:

人腎臟上皮細(xì)胞 4120 原代細(xì)胞產(chǎn)品,分離自正常人腎皮質(zhì)組織,經(jīng)細(xì)胞角蛋白(CK-18)免疫熒光鑒定,純度>90%。每瓶含>5×10?個活細(xì)胞,適用于腎臟生理、毒理及藥物轉(zhuǎn)運研究,需使用專用上皮細(xì)胞培養(yǎng)基。

  • 廠家實力

    Manufacturer Strength
  • 有效保修

    Valid Warranty
  • 質(zhì)量保障

    Quality Assurance

詳細(xì)介紹

人腎臟上皮細(xì)胞 4120

人腎臟上皮細(xì)胞 4120相關(guān)檢測ELISA試劑盒(ELISA法)是一款專為之人腎臟上皮細(xì)胞4120(Human Renal Epithelial Cells 4120)分泌蛋白、標(biāo)志物及相關(guān)因子定量檢測設(shè)計的高特異性、高靈敏度實驗試劑組合,廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)、腎臟生理學(xué)研究、腎臟疾?。ㄈ缒I炎、腎損傷)機(jī)制研究、腎臟再生修復(fù)研究及泌尿系統(tǒng)相關(guān)研究等領(lǐng)域,可實現(xiàn)人腎臟上皮細(xì)胞4120培養(yǎng)上清液、細(xì)胞裂解液、血清、血漿及腎臟組織勻漿等各類樣本中目標(biāo)因子含量的精準(zhǔn)定量檢測。該試劑盒采用雙抗體一步夾心法ELISA技術(shù),組分經(jīng)過嚴(yán)格篩選與優(yōu)化,針對人腎臟上皮細(xì)胞4120再生能力強(qiáng)、代謝活躍、具有半透膜特性的細(xì)胞特點及分泌蛋白特點優(yōu)化反應(yīng)體系,能有效規(guī)避樣本中腎臟組織碎片、雜蛋白、其他腎臟細(xì)胞分泌因子等成分的干擾,穩(wěn)定性強(qiáng)、操作便捷,無需復(fù)雜預(yù)處理步驟,能精準(zhǔn)捕捉樣本中微量目標(biāo)因子的特異性信號,適配低體積樣本檢測場景,為實驗人員提供高效、可靠的檢測工具,助力人腎臟上皮細(xì)胞4120相關(guān)實驗結(jié)果的精準(zhǔn)獲取與數(shù)據(jù)分析,本試劑盒僅供科研使用,不得用于臨床診斷,同時可適配人腎臟上皮細(xì)胞4120體外培養(yǎng)后的相關(guān)指標(biāo)檢測需求,契合其作為腎臟組織重要組成細(xì)胞的研究場景。

檢測原理

本試劑盒基于酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)的核心原理,采用雙抗體一步夾心法實現(xiàn)對人腎臟上皮細(xì)胞4120相關(guān)目標(biāo)因子(如腎損傷分子1、角蛋白18、緊密連接蛋白等)的定性與定量檢測,通過特異性免疫反應(yīng)精準(zhǔn)捕獲目標(biāo)蛋白,有效降低樣本中腎臟組織碎片、雜蛋白、其他腎臟細(xì)胞分泌因子等成分的非特異性干擾。試劑盒預(yù)先將純化的目標(biāo)因子捕獲抗體包被于酶標(biāo)微孔板上,形成固相抗體;實驗時,向微孔中依次加入待測樣本(人腎臟上皮細(xì)胞4120培養(yǎng)上清液、細(xì)胞裂解液等)、標(biāo)準(zhǔn)品及HRP標(biāo)記的目標(biāo)因子檢測抗體,樣本中的目標(biāo)因子會與固相抗體、HRP標(biāo)記檢測抗體特異性結(jié)合,形成“抗體-抗原-酶標(biāo)抗體"夾心復(fù)合物;經(jīng)過充分洗滌去除未結(jié)合的游離試劑及樣本中的干擾成分后,加入TMB顯色底物(部分試劑盒含底物A、B組分),TMB在HRP的催化下轉(zhuǎn)化為藍(lán)色,隨后在終止液(2M硫酸)的作用下轉(zhuǎn)化為最終的黃色。該黃色產(chǎn)物的顏色深淺與樣本中人腎臟上皮細(xì)胞4120相關(guān)目標(biāo)因子的含量呈正相關(guān),通過酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線即可實現(xiàn)對樣本中目標(biāo)因子含量的精準(zhǔn)定量,確保檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性與科學(xué)性,為人腎臟上皮細(xì)胞4120的功能研究、腎臟損傷修復(fù)、腎臟疾病機(jī)制相關(guān)實驗提供可靠數(shù)據(jù)支撐,契合腎臟上皮細(xì)胞維持腎臟正常功能的核心作用。

產(chǎn)品特點

1.  高靈敏度:檢測體系經(jīng)過人腎臟上皮細(xì)胞4120相關(guān)因子檢測適配優(yōu)化,檢測限可低至1.0 pg/mL,能精準(zhǔn)捕捉微量樣本中低濃度的目標(biāo)因子,有效避免漏檢,適配人腎臟上皮細(xì)胞4120培養(yǎng)上清液、細(xì)胞裂解液等低體積、低濃度樣本的檢測需求,契合腎臟上皮細(xì)胞分泌因子微量表達(dá)且代謝活躍的特性;
2.  特異性強(qiáng):試劑盒中的捕獲抗體與檢測抗體均對人腎臟上皮細(xì)胞4120相關(guān)目標(biāo)因子具有高度特異性,可有效避免與腎臟成纖維細(xì)胞、腎小管上皮細(xì)胞(其他亞型)、腎臟組織碎片及樣本中雜蛋白發(fā)生交叉反應(yīng),降低背景信號,提升檢測結(jié)果的特異性與可靠性,特異性交叉反應(yīng)率均低于5%,適配腎臟相關(guān)樣本的特異性檢測需求;
3.  操作便捷:組分搭配合理,試劑均為即用型或簡單稀釋后即可使用,針對人腎臟上皮細(xì)胞4120相關(guān)樣本(培養(yǎng)上清、細(xì)胞裂解液等)優(yōu)化預(yù)處理建議,實驗流程簡潔,可快速完成加樣、孵育、洗滌、顯色、檢測等操作,全程檢測時間約3.5小時,節(jié)省實驗時間,適配細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)后續(xù)檢測場景,兼顧腎臟上皮細(xì)胞體外培養(yǎng)的實操需求;
4.  穩(wěn)定性佳:試劑盒各組分均經(jīng)過嚴(yán)格質(zhì)量控制,批內(nèi)變異系數(shù)小于10%,批間變異系數(shù)小于15%,試劑活性穩(wěn)定,針對人腎臟上皮細(xì)胞4120相關(guān)因子檢測特性優(yōu)化儲存條件,能有效保障實驗結(jié)果的重復(fù)性與一致性,具備良好的回收率(85%-115%)與線性稀釋特性,適配細(xì)胞實驗的重復(fù)驗證需求,契合腎臟上皮細(xì)胞相關(guān)實驗的嚴(yán)謹(jǐn)性要求;
5.  適配性廣:可兼容普通酶標(biāo)儀(450nm波長),適配人腎臟上皮細(xì)胞4120培養(yǎng)上清液、細(xì)胞裂解液、血清、血漿、腎臟組織勻漿等多種樣本類型,檢測范圍可達(dá)5 pg/mL - 100 pg/mL,適用于科研領(lǐng)域各類人腎臟上皮細(xì)胞4120功能研究、腎臟損傷修復(fù)、腎臟疾病機(jī)制相關(guān)實驗,部分規(guī)格可根據(jù)需求定制檢測范圍,同時可適配人腎臟上皮細(xì)胞4120體外培養(yǎng)后的常規(guī)檢測需求,契合其再生能力強(qiáng)、可用于損傷修復(fù)研究的特性。

適用樣本類型

本試劑盒適用于人腎臟上皮細(xì)胞4120相關(guān)多種微量樣本,包括但不限于:人腎臟上皮細(xì)胞4120培養(yǎng)上清液、人腎臟上皮細(xì)胞4120裂解液、血清、血漿(EDTA、肝素抗凝均可)、人腎臟組織勻漿及純化后的目標(biāo)因子樣品等。(具體樣本處理方法請參考產(chǎn)品說明書),樣本處理過程中需注意避免樣本降解、污染,避免反復(fù)凍融,同時避免使用含NaN?的樣本(NaN?會抑制HRP活性);血清/血漿樣本需室溫放置2小時或4℃過夜析出,4℃1000×g離心20min收集上清,避免溶血樣本干擾;人腎臟上皮細(xì)胞4120裂解液需按試劑盒說明書比例用預(yù)冷裂解液制備,裂解后4℃12000×g離心10min收集上清,去除細(xì)胞碎片,兼顧其代謝活躍、易釋放胞內(nèi)因子的特點;腎臟組織勻漿建議按1:9重量體積比用預(yù)冷PBS(0.01M,pH=7.4)制備,裂解后離心收集上清,去除組織碎片;所有樣本需離心去除沉淀或懸浮物,保證樣本為澄清液體,避免腎臟組織碎片、雜蛋白殘留影響檢測結(jié)果,同時兼顧人腎臟上皮細(xì)胞4120體外培養(yǎng)的樣本處理特性,契合腎臟上皮細(xì)胞作為器官內(nèi)表面覆蓋細(xì)胞的樣本特點。

儲存與注意事項

(一)儲存條件
1.  試劑盒未開封時,需于2-8℃冷藏、避光儲存,避免冷凍、暴曬及溫度劇烈波動,嚴(yán)禁置于高溫、潮濕環(huán)境,保質(zhì)期通常為6個月,具體以產(chǎn)品外包裝標(biāo)簽為準(zhǔn);結(jié)合人腎臟上皮細(xì)胞4120相關(guān)因子的穩(wěn)定性,嚴(yán)格控制儲存溫度,避免因子降解,契合其代謝活躍相關(guān)因子易失活的特點;
2.  試劑盒開封后,各組分需密封保存,酶標(biāo)包被板需裝入自封袋并加入干燥劑,按說明書要求分別儲存(標(biāo)準(zhǔn)品等敏感組分使用后建議分裝,于-20℃冷凍儲存),HRP標(biāo)記抗體、TMB底物等需避光保存,避免交叉污染,試劑盒中未使用的組分需及時放回冰箱保存,尤其注意避免抗體試劑反復(fù)凍融,防止影響對人腎臟上皮細(xì)胞4120相關(guān)因子的檢測效果;
3.  試劑盒各組分開封后建議在規(guī)定時間內(nèi)用完,標(biāo)準(zhǔn)品等液體組分避免反復(fù)凍融(最多凍融3次),超過有效期嚴(yán)禁使用;濃縮洗滌液若有結(jié)晶析出,稀釋時可水浴加溫助溶,不影響檢測效果;樣本收集后需立即處理,人腎臟上皮細(xì)胞4120培養(yǎng)上清液、裂解液樣本若1周內(nèi)不檢測,需分裝凍存于-20℃或-80℃,凍存樣本建議在1-6個月內(nèi)檢測完畢,避免目標(biāo)因子降解,同時契合細(xì)胞培養(yǎng)樣本的短期保存需求,兼顧腎臟上皮細(xì)胞相關(guān)因子的穩(wěn)定性特點。
(二)注意事項
1.  實驗前需將試劑盒各組分從冷藏/冷凍環(huán)境中取出,在室溫(20-25℃)下平衡15-30分鐘,避免溫度驟變影響試劑活性與檢測結(jié)果,平衡后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上,自配緩沖液、洗滌液需用pH計測量確保合規(guī)(pH值偏差需控制在±0.1),避免pH異常影響抗原抗體結(jié)合,保障對人腎臟上皮細(xì)胞4120相關(guān)因子的精準(zhǔn)捕獲,契合其分泌因子對環(huán)境pH敏感的特性;
2.  操作過程中需保持實驗環(huán)境潔凈,建議在超凈工作臺內(nèi)進(jìn)行,避免灰塵、氣溶膠污染試劑及樣本,所有操作器具需潔凈,配置不同濃度標(biāo)準(zhǔn)品、加樣時需更換槍頭,避免交叉污染,降低實驗誤差,尤其注意避免人腎臟組織樣本、其他腎臟細(xì)胞樣本污染試劑,同時契合細(xì)胞培養(yǎng)的無菌操作要求,兼顧腎臟上皮細(xì)胞體外培養(yǎng)的無菌環(huán)境需求;
3.  微量加樣時需選用校準(zhǔn)合格的移液器及配套槍頭,嚴(yán)格遵循加樣規(guī)范,加樣時將液體加于酶標(biāo)板孔底部,避免觸及孔壁,一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),避免氣泡產(chǎn)生與試劑殘留,確保加樣精準(zhǔn),尤其注意人腎臟上皮細(xì)胞4120培養(yǎng)上清液、裂解液樣本的加樣均勻性,避免細(xì)胞碎片殘留導(dǎo)致的誤差,契合其代謝活躍、胞內(nèi)成分易釋放的特點;
4.  不同批號的試劑盒組分不得混用,也不可與其他廠家試劑盒組分混用;試劑使用前需輕輕顛倒混勻,避免劇烈震蕩,防止試劑變性;底物顯色液應(yīng)呈無色或很淺的顏色,已變藍(lán)的底物液不能使用,終止液加樣順序需與底物加樣順序一致,避免影響顯色效果與檢測結(jié)果,確保對人腎臟上皮細(xì)胞4120相關(guān)因子含量的精準(zhǔn)定量;
5.  洗板時需確保盡量吸干孔內(nèi)液體,使用自動洗板機(jī)可增加30秒浸泡步驟提升精度,避免洗板不徹di導(dǎo)致結(jié)果偏差,尤其需洗凈孔內(nèi)殘留的腎臟組織碎片、雜蛋白等干擾成分;溫育過程中不要讓微孔干燥,需正確使用封板膜;檢測前需消除板底殘留液體和手指印,避免影響OD值讀取,保障實驗數(shù)據(jù)的可靠性;
6.  實驗過程中需做好個人防護(hù),穿戴手套、口罩,避免試劑接觸皮膚與黏膜,避免血液、腎臟組織、細(xì)胞樣本接觸皮膚造成感染;試劑盒液體組分含防腐劑,需避免吸入煙霧;所有樣品、洗滌液和實驗廢棄物需按照實驗室規(guī)范妥善處理,若樣本可能傳播疾病,需嚴(yán)格按規(guī)定程序處理,同時契合細(xì)胞培養(yǎng)實驗的安全操作規(guī)范,兼顧腎臟相關(guān)樣本的生物安全要求;
7.  嚴(yán)格按照產(chǎn)品說明書的實驗流程、試劑用量及孵育條件操作,顯色后需在15分鐘內(nèi)完成OD值測定,任何操作偏差都可能導(dǎo)致檢測結(jié)果失真;實驗時建議設(shè)置復(fù)孔與標(biāo)準(zhǔn)曲線,提升數(shù)據(jù)可靠性;若樣本濃度高于標(biāo)準(zhǔn)品zui高濃度,需適當(dāng)稀釋后重新測定,稀釋過程需遵循規(guī)范,確保結(jié)果準(zhǔn)確,適配人腎臟上皮細(xì)胞4120相關(guān)因子的微量檢測需求,契合其分泌因子微量表達(dá)的特點。

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