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PC-12大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞系
PC-12大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞系在神經(jīng)生物學與腫瘤研究領域應用廣泛,憑借其兼具腎上腺嗜鉻細胞與神經(jīng)元的雙重特性,成為探究神經(jīng)分化機制、兒茶酚胺分泌調(diào)控及腫瘤細胞惡性轉(zhuǎn)化的重要實驗模型,為神經(jīng)內(nèi)分泌相關研究提供了可靠的細胞工具。
細胞特性與來源背景:該細胞系源自大鼠腎上腺髓質(zhì)嗜鉻細胞瘤組織,經(jīng)原代培養(yǎng)和克隆化建立。未分化狀態(tài)下細胞呈多角形或上皮樣,胞質(zhì)內(nèi)可見嗜鉻顆粒,細胞核呈圓形,位于細胞中央,核仁明顯;經(jīng)誘導后呈現(xiàn)神經(jīng)元樣形態(tài),長出細長突起,胞體縮小,核質(zhì)比增大。生長方式為貼壁生長,部分細胞輕微懸浮,傳代后 24 小時貼壁率約 92%。核心參數(shù)表現(xiàn)穩(wěn)定:倍增時間約 72 小時,連續(xù)傳代 60 次后仍保持異常染色體核型(染色體數(shù)約 43-45 條);神經(jīng)內(nèi)分泌標志物如羥化酶(TH)、多巴胺 β- 羥化酶(DBH)免疫熒光染色呈強陽性,細胞純度達 94%;無細菌、真菌、支原體及病毒污染,確保實驗結(jié)果的可靠性。
科研應用價值:在神經(jīng)分化研究中,PC-12 細胞經(jīng)神經(jīng)生長因子(NGF)誘導后,72 小時內(nèi)神經(jīng)元突起長度可達胞體直徑的 5 倍以上,微管相關蛋白 2(MAP2)表達量增加 3.8 倍,可模擬神經(jīng)元分化過程,為解析神經(jīng)突起生長的分子機制提供理想模型。兒茶酚胺分泌調(diào)控方面,該細胞在高鉀溶液刺激下,腎上腺素釋放量增加 2.7 倍,能很好地模擬嗜鉻細胞的分泌功能,助力交感神經(jīng)調(diào)控機制的探究。腫瘤研究領域,該細胞高表達原癌基因 c-Myc,其 mRNA 水平較正常腎上腺細胞升高 4.1 倍,經(jīng)相關藥物處理后凋亡率達 58%,適用于評估抗腫瘤藥物的療效及耐藥機制。此外,將細胞與施萬細胞共培養(yǎng),可構建體外神經(jīng) - 內(nèi)分泌交互模型,用于研究神經(jīng)遞質(zhì)對激素分泌的調(diào)節(jié)作用。
培養(yǎng)與保存規(guī)范:推薦使用含 10% 馬血清和 5% 胎牛血清的 RPMI-1640 培養(yǎng)基,添加 1% 抗生素混合液預防污染,培養(yǎng)環(huán)境為 37℃、5% CO?飽和濕度的恒溫培養(yǎng)箱。培養(yǎng)基需每 3 天更換一次,誘導分化時加入 50ng/ml NGF,每 2 天更換一次誘導培養(yǎng)基。傳代時采用含 EDTA 的消化液處理,37℃孵育 5-8 分鐘,待細胞間隙增大后加入含血清的培養(yǎng)基終止消化,傳代比例為 1:2-1:3,每 5-7 天傳代一次,維持細胞融合度在 60%-70% 以保持分化潛能。凍存液配方為基礎培養(yǎng)基 + 10% DMSO+20% 胎牛血清,經(jīng)程序降溫(-20℃1 小時→-80℃過夜→液氮保存)后,復蘇細胞存活率達 88% 以上,4-5 代內(nèi)可恢復正常的分化能力。運輸采用干冰凍存管或 T-25 培養(yǎng)瓶活細胞運輸,收到細胞后需靜置培養(yǎng) 24 小時,更換培養(yǎng)基后觀察細胞形態(tài),確認無異常漂浮物后進行后續(xù)實驗。該細胞系僅限科研使用,禁止用于臨床診療相關研究。
PC-12 大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞系以其du特的神經(jīng)分化潛能、明確的分泌特性及易于培養(yǎng)的優(yōu)勢,在神經(jīng)生物學與腫瘤學交叉研究中發(fā)揮著不可替代的作用,為推動神經(jīng)內(nèi)分泌領域研究的發(fā)展提供了有力支持。
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