L5178Y TK小鼠淋巴瘤細(xì)胞系
L5178Y TK小鼠淋巴瘤細(xì)胞系源自 DBA/2 小鼠自發(fā) T 細(xì)胞淋巴瘤，因胸苷激酶（TK）基因缺陷成為遺傳毒理學(xué)與腫瘤研究的標(biāo)gan模型。其du特的基因背景與生物學(xué)特性，使其在基因突變檢測(cè)、抗癌藥物研發(fā)等領(lǐng)域占據(jù)不可替代的地位。
顯微鏡下，該細(xì)胞呈懸浮生長(zhǎng)的圓形或類(lèi)圓形，直徑 10-12 微米，宛如培養(yǎng)基中漂浮的 “微型球體"。胞質(zhì)透亮，偶見(jiàn)細(xì)小顆粒，核質(zhì)比高，核仁清晰，彰顯旺盛的增殖活力。細(xì)胞倍增時(shí)間僅 12-16 小時(shí)，當(dāng)密度達(dá) 1×10?-2×10?個(gè) / 毫升時(shí)需傳代，傳代時(shí)無(wú)需yi酶消化，輕柔吹打即可分散，按 1:5-1:8 比例接種，連續(xù)培養(yǎng) 50 代仍保持穩(wěn)定表型。
培養(yǎng)體系需精準(zhǔn)模擬淋巴細(xì)胞微環(huán)境：基礎(chǔ)培養(yǎng)基選用 RPMI 1640，含谷an酰胺與丙酮酸滿足代謝需求；添加 10% 熱滅活胎牛血清（滅活可消除補(bǔ)體對(duì)細(xì)胞的損傷），并維持 37℃、5% CO?的恒溫環(huán)境，pH 值穩(wěn)定在 7.2-7.4。特別注意，細(xì)胞對(duì)滲透壓波動(dòng)極度敏感，換液時(shí)新舊培養(yǎng)基溫差需控制在 ±1℃內(nèi)，否則易引發(fā)凋亡。
作為國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化小鼠淋巴瘤試驗(yàn)（MLA）的指定細(xì)胞系，其 TK?/- 基因型是核心優(yōu)勢(shì)。TK 基因位于 11 號(hào)染色體，缺陷導(dǎo)致細(xì)胞無(wú)法合成胸苷激酶，而該酶是嘧啶核苷酸補(bǔ)救合成的關(guān)鍵。當(dāng)接觸誘變劑后，部分細(xì)胞可能發(fā)生 TK 基因突變回復(fù)（TK?/-），恢復(fù)酶合成能力。在含三氟xiong苷（TFT）的選擇培養(yǎng)基中，僅回復(fù)突變細(xì)胞能形成集落，通過(guò)集落計(jì)數(shù)可量化誘變活性。該模型可檢測(cè)點(diǎn)突變、染色體易位等多種遺傳損傷，靈敏度遠(yuǎn)超 Ames 試驗(yàn)，是化學(xué)品遺傳毒性分級(jí)的 “金標(biāo)準(zhǔn)"。
在抗癌藥物篩選中，細(xì)胞對(duì)多種hua療藥物呈現(xiàn)典型劑量反應(yīng)。對(duì) 6 - 巰基嘌呤等嘌呤類(lèi)似物、5 - 氟尿*啶等嘧啶類(lèi)似物，以及依tuo泊苷等拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑，均能通過(guò) MTT 法精準(zhǔn)測(cè)定 IC50。例如，篩選淋巴瘤新藥時(shí)，將藥物梯度處理細(xì)胞 48 小時(shí)，結(jié)合集落形成率分析，可快速鎖定高效化合物。其耐藥模型構(gòu)建也頗具價(jià)值：通過(guò)逐步提高藥物濃度誘導(dǎo)耐藥株，對(duì)比發(fā)現(xiàn)耐藥細(xì)胞 P - 糖蛋白表達(dá)升高 3-5 倍，為開(kāi)發(fā)耐藥逆轉(zhuǎn)劑提供直接依據(jù)。
腫瘤免疫研究中，細(xì)胞作為 NK 細(xì)胞殺傷實(shí)驗(yàn)的經(jīng)典靶標(biāo)，與 YAC-1 細(xì)胞共同構(gòu)成免疫活性檢測(cè)的 “雙標(biāo)gan"。用 LDH 釋放法檢測(cè)顯示，活化 NK 細(xì)胞對(duì)其殺傷率可達(dá) 40%-60%，能直觀反映免疫細(xì)胞功能狀態(tài)。構(gòu)建荷瘤模型時(shí)，皮下接種 DBA/2 小鼠 1 周即可形成腫瘤，腹腔接種則引發(fā)腹水，為免疫檢查點(diǎn)抑制劑等療法的體內(nèi)評(píng)估提供理想模型。
相較于其他檢測(cè)系統(tǒng)，該細(xì)胞系優(yōu)勢(shì)顯著：與 Ames 試驗(yàn)相比，可檢測(cè)哺乳動(dòng)物te有的誘變機(jī)制；較 CHO 細(xì)胞染色體畸變?cè)囼?yàn)，檢測(cè)周期從 3 天縮短至 48 小時(shí)。在疫苗安全性評(píng)價(jià)中，常用于檢測(cè)疫苗佐劑的遺傳毒性，是 WHO 推薦的生物制品質(zhì)控實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ汀?/span>
前沿應(yīng)用中，細(xì)胞在基因編輯效率驗(yàn)證領(lǐng)域嶄露頭角。通過(guò) CRISPR-Cas9 修復(fù) TK 基因，成功構(gòu)建的報(bào)告細(xì)胞系可通過(guò) TFT 抗性快速篩選陽(yáng)性克隆，使基因編輯效率檢測(cè)從傳統(tǒng)測(cè)序的 2 周縮短至 3 天。三維培養(yǎng)體系中，與成纖維細(xì)胞共培養(yǎng)形成的腫瘤球，其藥物敏感性更接近體內(nèi)腫瘤，為精準(zhǔn)醫(yī)療提供新的評(píng)估平臺(tái)。
以上信息僅供參考，詳細(xì)信息請(qǐng)聯(lián)系我們。
首頁(yè)-產(chǎn)品系統(tǒng)-細(xì)胞-細(xì)胞系-BY-0556L5178Y TK小鼠淋巴瘤細(xì)胞系
詳細(xì)介紹
聯(lián)系電話
產(chǎn)品咨詢
聯(lián)系我們